本作是前作《惡靈古堡：擴散》的續作（或可視為未收錄劇本的合集），同樣以八位普通市民為主角，補充了拉昆市事件中更多不為人知的求生故事。
惡靈古堡：擴散 FILE 2 —— 逃離被遺棄的城市
序章：野獸的咆哮（咆哮 / Wild Things）
【失控的動物園】 為了尋找救援直升機，市民們不得不穿越拉昆市動物園。 然而，病毒並不僅限於感染人類。動物園已化為野性的地獄。 巨大的喪屍象撞破圍牆，發出震耳欲聾的咆哮；喪屍獅子與土狼在園區內獵食；甚至連犀牛和巨嘴鳥都充滿了攻擊性。 眾人發現了一份報導，揭露副園長私下盜賣珍稀植物（蘭花）的醜聞，或許這也是導致園區管理崩潰的原因之一。 他們利用麻醉槍或重型獵槍擊退了發狂的巨象（或雄獅），終於穿過動物園搭上了電車。 但命運弄人，電車在途中急停——前方等待他們的，是墜毀的救援直升機與更深的絕望。
第一章：地底的蟲巢（異界 / Underbelly）
【地鐵站的夢魘】 為了躲避地面的屍潮，眾人逃入了地鐵站。這裡曾是地鐵員工吉姆工作的地方。 然而，這裡已被病毒感染的**巨型跳蚤（Mega Bite）所佔據。 為了啟動地鐵列車，他們必須尋找兩塊「兄弟徽章」來分離車廂。 在充滿巨型跳蚤的黑暗隧道中，他們與一隻極其巨大的女王跳蚤（Giga Bite）**展開激戰。 雖然成功啟動了列車，但列車並沒有帶他們離開城市，而是衝向了未知的深處（或因錯過列車而不得不爬通風塔逃回充滿喪屍的地面）。
第二章：森林中的幽靈（記憶 / Flashback）
【食人植物與瘋狂老頭】 眾人迷失在阿克雷山區的森林中，被一名神祕老人引導至一座廢棄醫院。 這座醫院早已被巨大的變異植物吞噬。 在探索中，記者艾莉莎回憶起過去：她曾與一位記者朋友來此調查，結果朋友慘遭殺害。 原來，那名引路老人正是醫院院長。他為了維持變成植物怪物的妻子「桃樂絲」的生命，不斷將迷路者誘騙至此當作飼料。 眾人利用除草劑殺死了變異植物（桃樂絲）。失去愛妻的院長發狂攻擊，最終抱著妻子的殘骸一同埋葬在崩塌的醫院中。
第三章：警察局的最後防線（死守 / Desperate Times）
【R.P.D. 的悲劇】 市民們逃到了拉昆市警察局（R.P.D.）。此時正是《惡靈古堡 2》發生前的幾天。 警局內充滿了神經毒氣，喪屍已攻破防線。 倖存的警官馬文指揮眾人尋找女神像的徽章，以開啟通往地下的秘密通道。新人女警麗塔自願爬過狹窄的通風管去求援。 在等待救援的期間，喪屍大軍衝破正門。 馬文與市民們利用所有的火力死守大廳。 終於，麗塔帶著救援車輛趕到。 但在最後一刻，受傷的馬文選擇留下：「我不能走……你們快走！」 車輛駛離，麗塔痛哭失聲。而在後視鏡中，馬文孤獨的身影淹沒在喪屍群中，他將在不久後變成里昂和克蕾兒遇到的那個受傷警官。
終章：突破封鎖線（突破 / End of the Road）
【保護傘研究所的內鬨】 時間來到滅菌作戰（核爆）前的最後時刻。 市民們在逃亡中遇到了保護傘研究員琳達和負責撤離的特種部隊成員羅德里格斯。 琳達堅持要回研究所拿取 T 病毒的疫苗樣本。 在研究所內，他們遇到了另一名研究員卡特。卡特為了保命，喚醒了被封存的暴君（T-0400TP），並利用控制器命令暴君消滅獵殺者。 然而，暴君失控了。它殺死了卡特，並將疫苗樣本踩碎。 琳達透露她還記得疫苗配方，眾人帶著受傷的琳達逃往地下水道。
【與死神賽跑】 在下水道，暴君緊追不捨。同時，美軍的特種部隊也誤將琳達當作喪屍攻擊。 就在眾人抵達市區街道準備搭乘直升機時，暴君進化成了更強大的形態（解除限制）。 他們利用卡特留下的引爆裝置（或重火力）將暴君炸入火海。
【核爆倒數】 如果成功趕上直升機： 直升機升空。羅德里格斯為了救眾人，拋棄了裝有珍貴 B.O.W.「紐克斯（Nyx）」的貨櫃。 如果錯過直升機： 眾人與琳達駕駛一輛吉普車，面對從貨櫃中逃出、吞噬了暴君的肉塊怪物紐克斯。在核彈落下的最後幾分鐘，他們擊敗了怪物，駕車衝入隧道。
【結局】 一道白光閃過。拉昆市化為灰燼。 無論是搭乘直升機還是吉普車，倖存者們都在遠處目睹了這一切。 琳達看著毀滅的城市，說道：「雖然失去了一切，但我們可以重新開始。」 這八位普通市民，經歷了地獄般的考驗，終於迎來了屬於他們的黎明。
—— Biohazard Outbreak File 2 End ——
【深度解析與補充】
時間軸的補完 本作的「死守」章節完美補完了《惡靈古堡 2》之前警局發生的事情，解釋了為什麼警局正門被封死、為什麼馬文受了重傷卻還活著、以及女神像密道的由來。
紐克斯（Nyx） 最終 BOSS 紐克斯是一個獨特的 B.O.W.，它能吞噬並同化其他生物（甚至暴君）。它的存在暗示了保護傘公司還有更多未知的恐怖實驗。
平凡人的結局 每個角色在結局後的電話留言都暗示了他們的未來：凱文在邁阿密當警察卻依然遲到、馬克與家人團聚、艾莉莎繼續揭發真相、喬治重返學術界……這些平凡的幸福，正是他們拚死求生的意義。
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